3R - Erstatning, reduksjon og forbedring av dyreforsøk

Bruk alternativer til levende dyr når det er mulig.

Dette kan inkludere:

• In vitro-metoder (cellekulturer, organoider)
• Datamodellering eller simuleringer
• Bruk av organismer med lavere grad av sansning (f.eks. virvelløse dyr i stedet for pattedyr, fugl eller fisk)

Alle som søker om å utføre forsøk med dyr i forskning, testing eller undervisning må dokumentere at det ikke finnes alternativer til bruk av dyr.

Kontrollspørsmål:

• Har det vært utvikling i ditt fagfelt (inkludert utvikling/validering av nye in vitro- eller in silico-teknikker) som kan erstatte deler av eller hele bruken av dyr for å besvare mitt forsøks-spørsmål?

Betyr å reduser antall dyr som brukes, uten å kompromittere vitenskapelig validitet.

Strategier inkluderer:

• Riktig statistisk planlegging (power-analyse)
• Deling av data og vev mellom prosjekter
• Bruk av longitudinelle studier i stedet for flere kohorter

Kontrollspørsmål:

• Har prosjektet/designet blitt vurdert på nytt for å muliggjøre ytterligere reduksjon i antall dyr?
• Er modellene som brukes fortsatt de mest hensiktsmessige?
• Er antallet dyr tilpasset statistisk analyse (for mange/for få)?
• Kan andre tilnærminger redusere dyrebruken ytterligere?

Tips for å redusere antall dyr:

• Gjør hvert dyr til sin egen kontroll (kan redusere med 50 %)
• Reduser variasjon ved:
  • Standardisering av dyrene (genetikk, mikrobiell status)
  • Standardisering av miljøforhold
  • Kontroll for variabler (som kjønn, stamme, linje) ved bruk av blokkeringsdesign

Forbedre prosedyrer for å redusere smerte, lidelse og stress og for å optimalisere dyrevelferd.

Eksempler:

• Bedre anestesi- og analgesi-protokoller
• Bruke Humane endepunkter
• Bruke miljøberikelse og forbedre forholdene for hold av dyr

Forbedring innebærer:

• Alle tiltak for å redusere eller eliminere negativ påvirkning på dyrene.
• Tiltak som optimaliserer dyrevelferd.
• Et verktøy for å forbedre forskningskvalitet: forsøk kan utføres raskere, billigere, med mindre risiko og bedre kvalitet.

Forbedring fremmer både god vitenskap og god dyrevelferd.

I søknaden om dyreforsøk må du dokumentere hvordan du har vurdert og implementert de 3R-ene.

Dette innebærer:

• Erstatning: Forklar hvorfor alternativer ikke er tilstrekkelige for din forskningsspørsmål.
  • Hvis du har vurdert in vitro- eller datamodeller, beskriv hvorfor de ikke kan erstatte dyreforsøk.
• Reduksjon: Begrunn antall dyr. Inkluder:
  • Statistiske beregninger (f.eks. power-analyse)
  • Planer for deling av data eller vev
  • Designvalg som reduserer duplisering
• Forfining: Beskriv hvordan du vil minimere lidelse:
  • Anestesi, analgesi og overvåking
  • Humane endepunkter
  • Berikelse og forbedret håndtering

Vis at du følger 3R-prinsippene:

• Bruk tydelige overskrifter for hver R i søknaden.
• Vær konkret: myndighetene forventer spesifikke tiltak, ikke generelle utsagn.
• Referer til retningslinjer som FELASA, AAALAC referanse ressurser, EU-direktiv 2010/63/EU) der det er relevant.

Forberedelse av dyr før forsøk

• Transport og akklimatisering:
  • Bruk klimakontrollerte kjøretøy, reduser reisetid, og gi karantene/akklimatisering (minst 7 dager) for å redusere stress.
• Oppstalling og berikelse:
  • Gi artsriktig berikelse: reirmateriale, skjul, leker, sosial oppstalling der mulig. Unngå unødig forstyrrelse ved rengjøring.
• Fôrings- og stellrutiner:
  • Oppretthold faste fôringstider, bruk smakelig fôr, og planlegg ikke-invasive helsesjekker. Unngå brå endringer i kosthold eller miljø.

Forsøksprosedyrer og smertelindring

• Anestesi og analgesi:
  • Beskriv optimaliserte protokoller (middel, dose, administrasjonsvei). Inkluder multimodal analgesi før, under og etter prosedyrer.
• Forfinet teknikk:
  • Bruk mindre invasive metoder (f.eks. subkutan i stedet for intraperitoneal). Benytt mikrokirurgiske verktøy. Tilvenn dyr til håndtering.
• Opplæring og kompetanse:
  • Sørg for at alle er opplært og sertifisert. Standardiser prosedyrer og dokumenter opplæring.

Forsøksdesign og humane endepunkter

• Designoversikt: Beskriv mål, tidslinje og gruppestruktur.
• Humane endepunkter: Definer tidlige endepunkter basert på objektive parametere (f.eks. vekttap >15 %, atferdsendringer). Angi tiltak (eutanasi eller behandling).
• Kontinuerlig overvåking: Beskriv observasjonsfrekvens. Bruk scoringsskjema for smerte og atferd.
• Intervensjonsprotokoller: Beskriv tiltak: justering av analgesi, væskebehandling, støttebehandling eller fjerning fra studien.

Overvåking og teknologi

• Ikke-invasive metoder: Fjernovervåking (video), automatiske sensorer for aktivitet for å redusere stress.
• Tidlig diagnostikk: Bruk sanntidsmålinger (telemetri, biomarkører) for å redusere invasive prøver.

FELASA-retningslinjer anbefaler å minimere stress og forbedre velferd ved avl og genotyping:

• Genotyping:
  • Foretrekk ikke-invasive eller minimalt invasive metoder (f.eks. kinnsvaber, hårprøver).
  • Bruk PCR-metoder med små prøvemengder.
  • Gi lokalbedøvelse ved invasive prøver.
• Genetisk kvalitetssikring:
  • Rutinemessige kontroller for å unngå unødvendig avl.
  • Validerte protokoller for å redusere gjentatte prøver.
• Oppstalling og stell:
  • Gi berikelse og sosial oppstalling der mulig.
  • Unngå unødig separasjon av mor og unger.

Myndighetene krever grundig dokumentasjon på at det ikke finnes egnede alternativer før dyreforsøk kan godkjennes.

Et godt søk viser at du følger etiske og juridiske krav og har vurdert muligheten for å erstatte dyreforsøk med andre metoder.

En dårlig eller for snever søkestrategi er en av de vanligste årsakene til forsinkelser i godkjenningsprosessen.

For å unngå dette bør du bruke flere databaser, inkludere relevante søkeord for dyremodell, prosedyrer og fagfelt, og dokumentere søket grundig med dato, søkestrenger og resultater.

Hvordan gjøre et godt søk:

• Bruk flere databaser:
  • Ikke stol kun på PubMed (alternativer er dårlig representert).
  • Bruk spesialiserte 3R-ressurser:
    • Norecopas 3R-guide (super-søkemotor)
    • EURL ECVAM-databaser
    • ALTEX og andre 3R-tidsskrifter
    • Retningslinjer fra FELASA, OECD, EU-direktiv 2010/63/EU
• Velg gode søkeord:
  • Dyremodell (f.eks. «zebrafisk», «gnager»)
  • Prosedyrer (f.eks. «genotyping», «avbildning», «toksisitetstesting»)
  • Fagfelt (f.eks. «kardiovaskulær», «nevrobiologi»)
  • Ord som «alternativ», «in vitro», «simulering», «organ-on-chip», «ikke-dyr metode»
• Dokumenter søket:
  • Oppgi databaser, søkestrenger og dato
  • Oppsummer funn og begrunn hvorfor alternativer ikke er tilstrekkelige

• Søkestrategi: databaser, søkeord, dato
• Resultatsammendrag: hvilke alternativer finnes og hvorfor de ikke er aktuelle
• Forpliktelse til kontinuerlig vurdering: oppgi at du vil følge med på nye alternativer under prosjektet